目次
易 喻1,李慧娟1,陈建澍1,梅建凤1,朱克寅2,应国清1
2013, 41(2): 147-151.
利用纸纤维为载体,制备高活性的固定化木瓜蛋白酶并应用于抗HCG抗体的水解.利用戊
二醛交联法,制备固定化木瓜蛋白酶,并通过一系列优化,得到最佳固定化条件,包括pH ﹑给酶量
﹑温度﹑戊二醛体积分数,将制备的固定化木瓜蛋白酶应用于抗HCG抗体水解并制备F(ab′)2
片
段.研究表明:反应温度为40℃时,固定化酶在pH 5.0,0.01mol/L的醋酸缓冲液条件下,给酶量
为46mg/g载体,戊二醛体积分数为0.01%时,固定化酶的酶活达到最高19 250U/g,相对于优化
前1 940U/g提高了近10倍,成功应用于抗HCG抗体水解制备F(ab′)2
片段:经SDS-PAGE电
泳检测,F(ab′)2
片段达到电泳纯.ELISA 反应检测表明:片段仍保留较高的活性,效价为1∶
12 000.